Ashley Greene wurde in Jacksonville geboren und wuchs dort ebenfalls auf. Sie hat einen älteren Bruder namens Joe, welcher nach ihrem Vater Joe benannt wurde. Ihre Mutter Michele und ihr Vater sind noch immer glücklich verheiratet. Mit 17 Jahren brach sie die High School ab und zog nach Los Angeles um an ihrer Schauspielkarriere zu arbeiten. Sie ist sehr gut mit Schauspielkollege Kellan Lutz befreundet, welchen sie durch ein anderes Filmprojekt bereits vor ihrer Rolle als Alice in Twilight kannte. Außerdem versteht sie sich blendend mit Jackson Rathbone und Rachelle Lefevre.
Zu Beginn wollte Ashley Model werden, da sie jedoch zu klein für den Laufsteg ist, konnte sie diesen Beruf nur kommerziell ausüben. Durch den Schauspiel- und Werbeunterricht, den sie genommen hatte entdeckte sie ihre Leidenschaft für das Schauspielern. Sie entschloss sich, die Schauspielerei dem Modeln vorzuziehen. Mit dem Film Twilight - Bis(s) zum Morgengrauen wurde sie auch International bekannt.